¿Qué puede pasar si no se hace el equilibrio en una columna cromatográfica flash?
Bart nos explica en este artículo cuáles son los principales riesgos que podría enfrentar en caso de que decida omitir el equilibrio
Equilibrar o no equilibrar los cartuchos flash de silica gel es una pregunta que he escuchado muchas veces. Dudar de la importancia del paso de equilibrio puede ser complicado. En realidad, existen algunos riesgos importantes a los que podría enfrentarse en caso de que decida omitirlo.
¿Equilibrar o no equilbrar?
Comenzando por el principio de que la etapa inicial de equilibrio, o, en otras palabras, la correcta humectación de la gel de sílice con el disolvente, es un proceso por el cual se libera calor a través de la adsorción del disolvente, la cantidad de calor en este caso depende de los siguientes parámetros:
- Tipo de disolvente: Como el gel de sílice es una sustancia polar, la adsorción de disolventes polares será más fuerte que la adsorción de disolventes menos polares y, por lo tanto, la generación de calor será más intensa.
- Tasa de flujo: Cuanto mayor es la tasa de flujo, mayor cantidad de calor se genera.
- La cantidad de silica gel: En columnas de menor tamaño, el calor puede desaparecer fácilmente debido a que el tiempo de residencia del disolvente es relativamente corto y se transfiere a la pred de la columna. En columnas más grandes, que contienen relativamente una mayor cantidad de silica, la transferencia de calor del disolvente hacia la pared es más lenta y, por lo tanto, se acumula una mayor cantidad de calor en el cartucho.
- El calor puede alcanzar niveles tan altos que podrían dañar la dureza del cartucho debido al aumento de la presión. Algo que a usted y a mí definitivamente nos gustaría evitar en nuestro trabajo diario de laboratorio.
- El calor liberado puede afectar al proceso de cromatografía (adsorción / desorción), lo que puede reducir la separación de los compuestos de la muestra.
- El calor generado puede provocar la evaporación parcial o completa de compuestos semivolátiles.
A continuación nuestras recomendaciones:
- Reducir la cantidad de disolventes polares en la mezcla para establecer el equilibrio.
- Reducir el flujo durante el equilibrado.
Una vez que cuide el empacado y la humectación del gel de sílice haya sido la adecuada,podrá controlar la liberación de calor y eliminar las consecuencias indeseables causadas por disolventes fuertemente polares y alta velocidad de flujo. Los efectos negativos se minimizarán, lo que garantizará que tenga los mejores resultados de separación.
